Medição de potássio
em folhas de plantas não lavadas 1

Este procedimento usa uma extração de TCA (ácido tricloroacético) do tecido para liberar todo o cálcio.

 

Foi constatado que não houve interferência significativa
de sódio, potássio ou fosfato presentes em um
amostra em níveis fisiológicos normais. A concentração de cálcio na faixa de 0,5 – 3,0 μg Ca / 100mg de amostra é prontamente determinada.     

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Procedimento

Solução e Preparação Padrão
Água destilada deionizada é usada para preparar as seguintes soluções: 

 

Fluido Diluente Orgânico contendo 500 ml de álcool isopropílico, 300 ml de água, 0,2 ml Non-Ion-Ox (ex. Aloe Scientific Co., St. Louis, Mo. USA), 74,6 mg KCl e 292 mg NaCl . TCA solução para extração de tecido foi de 6,2% p/v e para a preparação padrão foi de 8,3% p/v e também continha 19,5 mg NaCl / 100ml.

 

A solução de ácido tricloroacético a 6,25% é primeiro preparada. Para fazer isso, pese com precisão 6,25g de ácido tricloroacético e adicione-o a um balão volumétrico de 100ml, depois complete até a marca com água deionizada ou miliq. Para completar a solução de TCA a 8,3% p/v, 8,3 g de TCA foram dissolvidos da mesma maneira.

 

A solução padrão de cálcio primário foi preparada dissolvendo 250 mg de CaCO3 em 25ml of 2M HCl e diluída para 1l para dar 100 μg Ca/ml_cc781905-5cde-3194-bb3b-136bad5μcf58d_Padrões e reagentes em branco contendo 0 – 3 reagentes em branco Ca/ml foram preparados misturando 80ml de Fluido Diluente Orgânico, 15ml of 8,3% TCA, 0 - 3ml de Solução de Cálcio Primário e água deionizada para um volume final de 100ml._cc781905-5cde-3194-bb3b -136bad5cf58d_Ao realizar a análise e calibração, você será solicitado a analisar ou pular a análise em branco antes da calibração e medição da amostra. O Fluido Diluente Orgânico preparado anteriormente deve ser executado como branco para esta análise.

 

Extração de tecido

Prepare uma fatia de tecido de aproximadamente 0,5 mm de espessura. Mergulhe rapidamente a fatia de tecido em uma solução de incubação sem cálcio e seque cuidadosamente em papel de filtro. Pesar com precisão, para produzir amostras na faixa de 100 mg de peso úmido.

 

Transfira a amostra para o tubo de centrifugação, adicione TCA a 6,2% suficiente para obter um volume de 2 ml. Agite vigorosamente o tubo 3 vezes ao longo de um período de 30 minutos.   _cc781905-5cdde_31cf58d__cc58d_31cf58d__cc58d_316badcf

 

Adicione um volume de 8 ml de Fluido Diluente Orgânico ao tubo e centrifugue. O sobrenadante é analisado diretamente. 

 

Preparação do gráfico padrão

Configure o fotômetro de chama de acordo com a Calibração MultiPoint/Single Ion encontrada na página 24 do Manual de Instalação e Operação da BWB Technologies, para medir a emissão de potássio. Nebulize as soluções padrão de trabalho e ajuste os controles até que as leituras máximas e zero constantes sejam obtidas. Nebulize as soluções padrão de trabalho intermediárias e construa um gráfico relacionando os dados brutos de emissão (conhecido como RAW in  BWB o fotômetro de chama) à concentração de todas as soluções padrão.