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Somos el importador/distribuidor exclusivo de fotĆ³metros de llama BWB en los EE. UU. y CanadĆ” y proporcionamos instrumentaciĆ³n a las regiones de habla hispana en AmĆ©rica Central y del Sur y los paĆses del Caribe.
MediciĆ³n de calcio
en ADN y DNP 1
El contenido de calcio de las aguas
Las soluciones de Ć”cido desoxirribonucleico (ADN) y desoxirribonucleoproteĆna (DNP) no se pueden analizar directamente debido a los efectos de interferencia.
Un procedimiento de extracciĆ³n con Ć”cido permitirĆ” mediciones directas de calcio en ADN y DNP, o se utiliza una tĆ©cnica de adiciĆ³n estĆ”ndar a concentraciones mĆ”s altas.
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Procedimiento
Se usa agua destilada desionizada en todo el proceso. La cristalerĆa se limpia con Ć”cido y se enjuaga completamente con agua desionizada antes de usar para evitar la contaminaciĆ³n. _cc781905-5cde-3194-bb3b-536dbad5cf
ExtracciĆ³n de Ć”cido
Los extractos Ć”cidos se preparan aƱadiendo 1 volumen de HCl 1 M a 19 volĆŗmenes de soluciĆ³n de muestra que contiene ADN o DNP en agua y se dejan reposar a 700 Ā°C durante la noche. Cuando hay una suspensiĆ³n, la muestra se centrifuga a 2000G durante 10 minutos para obtener la fracciĆ³n soluble. Alrededor del 99 % del ADN y alrededor del 80 % de la proteĆna se vuelven solubles en HCl despuĆ©s de permanecer durante la noche en HCl. La concentraciĆ³n de ADN de DNP es de aproximadamente 40 % p/p.
La soluciĆ³n de muestra debe tener una concentraciĆ³n de ADN entre 50 ppm y 100 ppm de ADN. Por lo tanto, debe tenerse en cuenta que las lecturas pueden causar una falta de estabilidad si las concentraciones de iones estĆ”n presentes por encima de 100 ppm. Si bien el fotĆ³metro de llama puede detectar lecturas de iones superiores a 100 ppm, no se recomienda. Esto se debe a la materia que puede depositarse en el nebulizador y efectuar otras mediciones por las gotitas que salen durante otras mediciones. Esto significa que se aumenta la frecuencia con la que el nebulizador requiere limpieza y se recomienda una mayor diluciĆ³n de la muestra.
TƩcnica de suma estƔndar
La tĆ©cnica de adiciĆ³n estĆ”ndar es un medio para estimar la concentraciĆ³n en una soluciĆ³n donde tambiĆ©n se sabe que hay metales que interfieren.
La tĆ©cnica mide la recuperaciĆ³n de cantidades conocidas aƱadidas a la concentraciĆ³n de soluciĆ³n desconocida. Las soluciones de muestra se preparan agregando 1 o 2 ml alcuotas de soluciĆ³n de muestra a una soluciĆ³n estĆ”ndar de calcio.
La concentraciĆ³n de calcio de la soluciĆ³n de muestra original se calcula trazando la concentraciĆ³n de la soluciĆ³n estĆ”ndar y la soluciĆ³n estĆ”ndar mĆ”s la muestra; la diferencia menos el blanco de HCl para cada curva trazada serĆ” la concentraciĆ³n de la soluciĆ³n desconocida.
PreparaciĆ³n de grĆ”fico estĆ”ndar
Configure el fotĆ³metro de llama de acuerdo con la CalibraciĆ³n multipunto/de un solo ion que se encuentra en la pĆ”gina 24 del Manual de instalaciĆ³n y operaciĆ³n de BWB Technologies, para medir la emisiĆ³n de potasio. Nebulice las soluciones estĆ”ndar de trabajo de litio y ajuste los controles hasta que se obtengan lecturas constantes de cero y mĆ”ximas. Nebulice las soluciones estĆ”ndar de trabajo intermedias y construya un grĆ”fico que relacione los datos de emisiĆ³n sin procesar (conocidos como RAW en BWB el fotĆ³metro de llama) con la concentraciĆ³n de todas las soluciones estĆ”ndar.
1 Itzhaki, R., 'EstimaciĆ³n de calcio en desoxirribonucleoproteĆna y Ć”cido desoxirribonucleico mediante fotometrĆa de llama', Anal. BioquĆmica 33, (1970), pĆ”gs. 76-86
