Medición de potasio
en Hojas de plantas sueltas 1


Este procedimiento utiliza una extracción del tejido con TCA (Ôcido tricloroacético) para liberar todo el calcio.
Se encontró que no hubo interferencia significativa.
del sodio, potasio o fosfato presente en un
muestra a niveles fisiológicos normales. La concentración de calcio en el rango de 0,5 a 3,0 μg Ca/100 mg de muestra se determina fÔcilmente.
ā
Procedimiento
Preparación de soluciones y estÔndares
Se utiliza agua destilada desionizada para preparar las siguientes soluciones:
LĆquido diluyente orgĆ”nico que contiene 500 ml de alcohol isopropĆlico, 300 ml de agua, 0,2 ml Non-Ion-Ox (ex. Aloe Scientific Co., St. Louis, Missouri, EE. UU.), 74,6 mg de KCl y 292 mg de NaCl . TCA para la extracción de tejido fue del 6,2 % p/v y para la preparación estĆ”ndar fue del 8,3 % p/v y tambiĆ©n contenĆa 19,5 mg de NaCl/100 ml.
Primero se prepara una solución de Ôcido tricloroacético al 6,25%. Para hacer esto, pese con precisión 6,25 g de Ôcido tricloroacético y agréguelos a un matraz volumétrico de 100 ml, luego enrase con agua desionizada o miliq. Para completar la solución de TCA al 8,3% p/v, se disolvieron 8,3 g de TCA de la misma manera.
La solución estĆ”ndar de calcio primario se preparó disolviendo 250 mg de CaCO3 en 25 ml de HCl 2 M y se diluyó a 1 l para dar 100 μg Ca / ml EstĆ”ndares y blancos de reactivo que contenĆan 0 ā μg Ca/ml se prepararon mezclando 80 ml de lĆquido diluyente orgĆ”nico, 15 ml de TCA al 8,3 %, 0 ā 3 ml de solución primaria de calcio y agua desionizada hasta un volumen final de 100 ml._cc781905-5cde-3194-bb3b -136bad5cf58d_Al realizar el anĆ”lisis y la calibración, se le pedirĆ” que analice u omita el anĆ”lisis en blanco antes de la calibración y la medición de la muestra. El fluido de dilución orgĆ”nico preparado previamente debe ejecutarse como blanco para este anĆ”lisis.
Extracción de tejido
Prepare una rebanada de tejido de aproximadamente 0,5 mm de espesor. Sumergir rÔpidamente la rebanada de tejido en una solución de incubación sin calcio y secar con cuidado en papel de filtro. Accurately weigh, to yield samples in the range of 100 mg wet weight.
Transfiera la muestra al tubo de centrĆfuga, agregue suficiente TCA al 6,2 % para obtener un volumen de 2 ml. Agite enĆ©rgicamente el tubo 3 veces durante un perĆodo de 30 minutos.
AƱadir un volumen de 8 ml de lĆquido diluyente orgĆ”nico al tubo y centrifugar. El sobrenadante se analiza directamente.
Preparación de grÔfico estÔndar
Configure el fotómetro de llama de acuerdo con la Calibración multipunto/de un solo ion que se encuentra en la pÔgina 24 del Manual de instalación y operación de BWB Technologies, para medir la emisión de potasio. Nebulice las soluciones estÔndar de trabajo y ajuste los controles hasta que se obtengan lecturas constantes de cero y mÔximas. Nebulice las soluciones estÔndar de trabajo intermedias y construya un grÔfico que relacione los datos de emisión sin procesar (conocidos como RAW en BWB el fotómetro de llama) con la concentración de todas las soluciones estÔndar.
1 Geyer, RP y Bowie, EJ, 'La microdeterminación directa del calcio tisular por fotometrĆa de llama', Anal. Biochem., 2, (1961), 360-369.
