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Medición de potasio
en Hojas de plantas sueltas 
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Este procedimiento utiliza una extracción del tejido con TCA (ácido tricloroacético) para liberar todo el calcio.

 

Se encontró que no hubo interferencia significativa.
del sodio, potasio o fosfato presente en un
muestra a niveles fisiológicos normales. La concentración de calcio en el rango de 0,5 a 3,0 μg Ca/100 mg de muestra se determina fácilmente.    
 

Procedimiento

Preparación de soluciones y estándares
Se utiliza agua destilada desionizada para preparar las siguientes soluciones: 

 

Líquido diluyente orgánico que contiene 500 ml de alcohol isopropílico, 300 ml de agua, 0,2 ml Non-Ion-Ox (ex. Aloe Scientific Co., St. Louis, Missouri, EE. UU.), 74,6 mg de KCl y 292 mg de NaCl . TCA para la extracción de tejido fue del 6,2 % p/v y para la preparación estándar fue del 8,3 % p/v y también contenía 19,5 mg de NaCl/100 ml.

 

Primero se prepara una solución de ácido tricloroacético al 6,25%. Para hacer esto, pese con precisión 6,25 g de ácido tricloroacético y agréguelos a un matraz volumétrico de 100 ml, luego enrase con agua desionizada o miliq. Para completar la solución de TCA al 8,3% p/v, se disolvieron 8,3 g de TCA de la misma manera.

 

La solución estándar de calcio primario se preparó disolviendo 250 mg de CaCO3 en 25 ml de HCl 2 M y se diluyó a 1 l para dar 100 μg Ca / ml Estándares y blancos de reactivo que contenían 0 – μg Ca/ml se prepararon mezclando 80 ml de líquido diluyente orgánico, 15 ml de TCA al 8,3 %, 0 – 3 ml de solución primaria de calcio y agua desionizada hasta un volumen final de 100 ml._cc781905-5cde-3194-bb3b -136bad5cf58d_Al realizar el análisis y la calibración, se le pedirá que analice u omita el análisis en blanco antes de la calibración y la medición de la muestra. El fluido de dilución orgánico preparado previamente debe ejecutarse como blanco para este análisis.

 

Extracción de tejido

Prepare una rebanada de tejido de aproximadamente 0,5 mm de espesor. Sumergir rápidamente la rebanada de tejido en una solución de incubación sin calcio y secar con cuidado en papel de filtro. Accurately weigh, to yield samples in the range of 100 mg wet weight.    

 

Transfiera la muestra al tubo de centrífuga, agregue suficiente TCA al 6,2 % para obtener un volumen de 2 ml. Agite enérgicamente el tubo 3 veces durante un período de 30 minutos.

 

Añadir un volumen de 8 ml de líquido diluyente orgánico al tubo y centrifugar. El sobrenadante se analiza directamente. 

 

Preparación de gráfico estándar

Configure el fotómetro de llama de acuerdo con la Calibración multipunto/de un solo ion que se encuentra en la página 24 del Manual de instalación y operación de BWB Technologies, para medir la emisión de potasio. Nebulice las soluciones estándar de trabajo y ajuste los controles hasta que se obtengan lecturas constantes de cero y máximas. Nebulice las soluciones estándar de trabajo intermedias y construya un gráfico que relacione los datos de emisión sin procesar (conocidos como RAW en  BWB el fotómetro de llama) con la concentración de todas las soluciones estándar.

1 Geyer, RP y Bowie, EJ, 'La microdeterminación directa del calcio tisular por fotometría de llama', Anal. Biochem., 2, (1961), 360-369.

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